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細想分光光度計的步驟與方法

 更新時(shí)間:2020-03-19 點(diǎn)擊量:1225
   分光光度計是采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(cháng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(cháng)的光源,光線(xiàn)透過(guò)測試的樣品后,部分光線(xiàn)被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。分光光度計已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。我們知道如何使用分光光度計的步驟嗎?
  預熱儀器:為使測定穩定,將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi),使儀器預熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續光照。預熱儀器時(shí)和在不測定時(shí)應將比色皿暗箱蓋打開(kāi),使光路切斷。
  選定波長(cháng):根據實(shí)驗要求,轉動(dòng)波長(cháng)調節器,使指針指示所需要的單色光波長(cháng)。
  固定靈敏度檔:根據有色溶液對光的吸收情況,為使吸光度讀數為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動(dòng)靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實(shí)驗過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測量固定在“1”檔。
  調節“0”點(diǎn):輕輕旋動(dòng)調“0”電位器,使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí),比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的,光路被切斷,光電管不受光照)。
  調節T=100%:將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的格內,有色溶液放在其它格內,把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉動(dòng)光量調節器,使透光度T=100%,即,表頭指針恰好指在T=100%處。
  測定:輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿,使有色溶液進(jìn)入光路,此時(shí)表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A,讀數后,打開(kāi)比色皿暗箱蓋。
  關(guān)機:實(shí)驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。