分光光度計是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收的特性,以較純的單色光作為入射光,測定物質(zhì)對光的吸收,從而對物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的儀器。選擇分光光度計所關(guān)注的關(guān)鍵指標有三點(diǎn):一是波長(cháng)范圍,二是波長(cháng)準確度,三是雜散光參數。波長(cháng)范圍的選擇是由用戶(hù)實(shí)驗需要所定,波長(cháng)范圍越寬的價(jià)格越貴;波長(cháng)準確度及雜散光參數的數值越低,表示性能越好。
1、波長(cháng)準確度的檢驗
分光光度計在使用過(guò)程中,由于機械振動(dòng)、溫度變化、燈絲變形、燈座松動(dòng)或更換燈泡等原因,經(jīng)常會(huì )出現刻度盤(pán)上的讀數與實(shí)際通過(guò)溶液的波長(cháng)不符合的現象,因而導致儀器靈明度降低,影響測定結果的精度,需要進(jìn)行檢驗。
檢驗波長(cháng)準確度簡(jiǎn)單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量?jì)x器的吸收峰值,如果測出的值與濾光片標準值之差超出規程規定,則需要進(jìn)行波長(cháng)調節。
2、透射比正確度的檢驗
用透射比標準值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見(jiàn)光區分別在440、546、635nm波長(cháng)處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長(cháng)處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。
3、穩定度的檢驗
在零點(diǎn)不受光的條件下,用零點(diǎn)調節器將儀器調至零點(diǎn),觀(guān)察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點(diǎn)穩定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,調節零點(diǎn)后,蓋上樣品室蓋,使光電管受光,調節透射比為95%(數顯儀器調至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩定性。
4、光的檢驗
可見(jiàn)分光計棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計在220nm處分別用符合規定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應波長(cháng)下的雜散輻射率。